新冠肺炎 | PCR实验室如何建设
发布时间：2020-08-19 11:02:45
通知要求各地要结合新冠疫情防控和检测需求，加强医疗卫生机构实验室建设。三级综合医院均应当建立符合生物安全二级及以上标准的临床检验实验室建设，具备独立开展新型冠状病毒检测的能力；各级疾控机构和有条件的专科医院、二级医院、独立设置的医学检验实验室也应当加强实验室建设，提高检测能力。
对于新型冠状病毒感染疫情，快速启动的病毒核酸检测，在感染病例诊断和疫情防控中发挥了突出的作用。于是新冠核酸检测PCR实验室如何建设，成为关注焦点，今天我们一起来了解一下PCR实验室建设。
01
PCR实验室建设设计的送、排风设计及排放准则
PCR实验室建设并没有严格的净化要求，但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性，宜采用全送全排的气流组织形式。同时，要严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。
（1）核心实验室气流组织应采用顶送侧排方式。
（2）送风口宜远离生物安全柜等通风设备，避免气流干扰。
（3）高效过滤排风口应设计在实验室内污染最严重的区域，且为单向。
PCR实验室建设的空气流向必须严格按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区空气压力逐渐递减方式进行，防止扩增产物顺空气气流进入扩增前的区域。各个区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、人流与气流，形成单向流程的保护屏障，避免实验之间的相互干扰，防止核酸气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。需要严格的通风设计，若通风设计不合理，会使风速流向混乱，甚至危害人们健康。
02
PCR实验室建设人流路径与物流路径设计要合理
进入实验室区域工作人员应该按照以下路径：
公共清洁区——更衣间——缓冲间——污染实验区。
工作人员退出实验室的路径为：
污染试验区——缓冲间——淋浴间——更衣间——公共清洁区。
03
PCR实验室污染的预防与控制
PCR实验室设计的核心问题是如何避免污染。在实际工作中，常见的有以下几种污染类型：扩增产物的污染；天然基因组DNA的污染；试剂的污染以及标本间的污染。
由于一旦发生污染，实验就必须停止，直到找到污染源为止，而且实验结果必须作废，需重新进行实验。所以发生污染后再围绕实验室来寻找污染源不但耗时而且繁琐，浪费人力物力。因此要避免污染，首先应是预防，而不是排除。
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PCR实验室建设不可缺少的严格管理
（1）严格控制进出实验室的人员。与实验无关的人员不得随意进出实验室，有条件的情况下要设置独立的通道和进出整个实验区的门；
（2）尽量减少在实验区内不必要的走动以减少交叉污染的可能性；
（3）扩增产物分析区是主要的扩增产物污染来源，废液不能直接排放，需经过污水系统处理后达标排放。用过的吸头等一次性材料也应经消毒液浸泡消毒后统一处理，如焚烧等；
（4）扩增产物分析区可能会用到某些可致基因突变和有毒物质，应特别注意实验人员的安全防护。完备的实验室配套设施是保证实验工作的必要条件，应根据各个实验室实验内容的不同配备相应的设备和仪器，如超净工作台、离心机、加样器等。
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